細胞周期的分析

       細胞周期（cell cycle）是指細胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的全過程，分為間期與分裂期兩個階段。間期又分為三期、即DNA合成前期（G1期）、DNA合成期（S期）與DNA合成后期（G2期）。細胞分裂期又稱M期。細胞通過M期一分為二，有的可繼續(xù)分裂進行周期循環(huán)，有的轉(zhuǎn)入G0期。G0期是脫離細胞周期暫時停止分裂的一個階段。但在一定適宜刺激下，又可進入周期（圖1），合成DNA與分裂。G0期的特點為：在未受刺激的G0細胞，DNA合成與細胞分裂的潛力仍然存在；當(dāng)G0細胞受到刺激而增殖時，又能合成DNA和進行細胞分裂。根據(jù)各個期細胞DNA的含量將細胞周期用G0/G1期、S期和G2/M期來表示，通過核酸染料標記，并由流式細胞儀進行分析，可以得到細胞各個時期的分別狀態(tài)，計算出G0/G1期、S期和G2/M期細胞的比例，了解細胞的周期分布及細胞的增殖活性。當(dāng)然，也可以通過檢測細胞周期蛋白對細胞周期進行精確的分期，但常用的檢測方法還是利用流式細胞儀進行分析。細胞周期分析常用于腫瘤的早期診斷、腫瘤的良惡性判斷、觀察細胞的增殖狀態(tài)及周期分布和抗腫瘤治療的療效監(jiān)測等。

      在進行流式細胞儀檢測細胞周期分布的時候，應(yīng)注意以下幾點：首先，消化細胞的時候，胰酶消化的時間不宜過長，防止對細胞膜的損傷。其次，細胞樣品的采集要保證足夠的細胞濃度，以大于10⁶為宜。第三，細胞固定時，75%乙醇溶液固定效果較好，且固定時間不宜過長，固定后的細胞盡量隨即上機檢測，4℃保存時間不要過長。提前計劃好實驗，提前預(yù)約流式細胞儀的使用時間

儀器推薦：細胞計數(shù)儀